CpG寡聚脱氧核苷酸增强树突状细胞疫苗诱导的特异性抗前列腺癌作用

摘要

目的观察CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）对截短的人前列腺特异性膜抗原（tPSMA）基因修饰的树突状细胞（DCs）诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统,通过基因重组技术构建Ad-tPSMA及Ad-eGFP。将Ad-tPSMA和Ad-eGFP感染鼠源性DCs,用含10μg/L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素（IL）-4和含10%胎牛血清（FCS）的RPMI 1640培养基诱导培养6 d后,然后再添加1 mg/L的CpG-ODN体外培养1d,最后添加1 mg/L的脂多糖（LPS）继续培养1 d,使其成熟。流式细胞仪检测DCs细胞表型,CCK-8法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测T细胞分泌细胞因子[IL-2、干扰素（INF）-γ]的影响,CCK-8试剂检测T细胞特性杀伤靶细胞活性。结果 CpG-ODN促进Ad-tPSMA感染的DCs（CpG/DCs-Ad-tPSMA）高表达MHCⅡ（83.8±3.7）%、CD80（79.8±5.6）%和CD86（78.3±2.8）%,且刺激同种异体T细胞增殖能力明显高于DCs-Ad-tPSMA组、DCs-Ad-eGFP组和未转染的DCs组（P＜0.05）;培养上清中细胞因子IL-2（179.64±2.72）ng/L和INF-γ（1581.75±28.61）ng/L,表达水平均明显高于DCs-Ad-tPSMA组、DCs-Ad-eGFP组和未转染的DCs组（P＜0.05）;CpG/DCs-Ad-tPSMA组诱导RM-1-tPSMA细胞特异性杀伤率为（55.3±1.2）%,明显高于DCs-Ad-tPSMA组（40.7±1.4）%、DCs-Ad-eGFP组（12.7±1.2）%和未转染的DCs组（10.8±1.7）%（P＜0.05）。结论 CpG-ODN能增强PSMA基因修饰的DCs疫苗诱导的特异性抗前列腺癌效应。