5-杂氮-2’-脱氧胞苷对三阴性乳腺癌细胞肺转移的抑制作用

摘要

目的探讨5-杂氮-2’-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对三阴性乳腺癌（TNBC）MDA-MB-231细胞实验性肺转移的影响及其机制。方法将MDA-MB-231细胞分对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量逆转录-聚合酶链反应（SqRT-PCR）与甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法检测乳腺癌转移抑制基因-1（BRMS1）、CXC趋化因子受体-4（CXCR4）基因的mRNA表达与启动子区甲基化状况。然后通过边缘尾静脉将2×10~5个细胞注射到每只BALB/C nu/nu裸鼠体内（每组5只）,5周后,通过荧光定量RT-PCR（FqRT-PCR）检测裸鼠肺组织内目的基因HPRT mRNA丰度来确定癌细胞肺转移程度。结果对照组与处理组细胞的BRMS1相对灰度值（IDV）分别为0与0.390±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达明显上调（P＜0.05）,5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化;CXCR4相对IDV分别为0.580±0.003与0.580±0.010,两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）,CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变;接种对照组与处理组细胞的裸鼠肺脏HPRT、GAPDH的Ct值分别为:24.75±1.55、16.19±0.69与27.61±1.67、17.48±0.96,2△△Ct=0.34,转移抑制率为66%,处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度低,转移的癌组织较少。结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活了肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,降低了TNBC MDA-MB-231细胞实验性肺转移的能力。