氧化苦参碱对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制

摘要

目的观察氧化苦参碱（OXY）对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法噻唑蓝（MTT）法测定OXY对A549人肺癌细胞活力的作用。流式细胞术测定A549细胞凋亡率。荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot方法测定OXY对A549细胞B淋巴细胞/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）mRNA和蛋白表达的影响。Western blot方法测定OXY对A549细胞的细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）、c-Jun氨基端激酶（JNK）、p38丝裂原活化激酶（p38MAPK）、磷酸化ERK（p-ERK）、p-JNK、p-p38MAPK蛋白表达的影响。结果 OXY可抑制A549细胞增殖。与对照组[（5.63±0.76）%]比较,OXY组细胞凋亡率[（13.26±2.15）%]上升（P＜0.01）;与对照组（1.02±0.27、0.23±0.04）比较,OXY组bax mRNA（1.61±0.19）和蛋白（0.71±0.10）表达上升（P＜0.05,P＜0.01）;与对照组比较（0.94±0.14、0.64±0.09）,OXY组bcl-2mRNA（0.42±0.05）和蛋白（0.21±0.04）表达下降（P＜0.01）。与对照组（0.29±0.03）比较,OXY组p-JNK表达水平（0.66±0.06）明显升高（P＜0.01）,其他蛋白表达均无明显变化。与OXY组（0.66±0.07、0.28±0.03、0.65±0.08）比较,同时给予OXY和P-JNK抑制剂SP600125组bax蛋白表达（0.39±0.05）下降,bcl-2表达（0.50±0.08）上升,p-JNK蛋白（0.26±0.04）表达下降（P＜0.01）。结论 OXY碱可诱导A549细胞凋亡,可能与升高p-JNK水平有关。