NS398诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及其机制的研究

摘要

非甾体类抗炎药(NSAIDs)能够诱导各种肿瘤细胞的凋亡,从而抑制其生长。有研究证实作为NSAIDs的一种,NS398除了对COX-2的选择性抑制作用外,还可通过其他途径诱导肿瘤凋亡.本文主要通过在细胞株A549中加入NS398后,来观察NS398对细胞的凋亡影响并初步探究其可能的凋亡机制.实验主要采用MTT法检测NS398对A549细胞生长的抑制率,并用形态学检查细胞凋亡情况,同时用RT-PCR法检测survivin、caspase-3 mRNA表达,用Western blot法检测survivin、caspase-3和p-AKT蛋白表达。MTT的结果显示NS398能够抑制A549细胞生长,其中,NS398(400μmol／L)作用48小时后,A549细胞抑制率可高达66.95％,同时,形态学检查发现细胞形状不规则,核质体呈绿色,染色体浓缩,细胞核大小不一,呈凋亡特征。RT-PCR的结果显示,NS398作用48小时的实验组与对照组比较,survivinmRNA表达量显著减少(P<0.05,P<0.01,P<0.001),并且caspase-3 mRNA表达量显著增加(P<0.05,P<0.001),均呈剂量依赖性。而作用48小时后的实验组与对照组比较,survivin和p-AKT蛋白表达量显著减少(P<0.01,P<0.001),caspase-3蛋白表达量显著增加(P<0.05,P<0.001),均呈剂量依赖性。上述研究结果表明,NS398能够诱导A549细胞凋亡,抑制肿瘤生长,其抗肿瘤作用机制可能与抑制AKT磷酸化以及下调survivin蛋白表达有关,为临床应用NS398防治肺癌提供了部分理论基础及实验依据。