细胞外源性神经酰胺对人膀胱癌细胞凋亡的诱导作用及其机制

摘要

目的探讨细胞外源性神经酰胺对人膀胱癌细胞凋亡的诱导作用及其分子机制。方法应用浓度分别为10、20、40μmol/L的C2-神经酰胺（C2-cer）作用于人膀胱癌T24细胞,倒置显微镜下观察作用效果,吖啶橙（AO）荧光染色检测细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪（FCM）检测各组细胞凋亡率变化,Western blot检测凋亡诱导因子（AIF）在细胞内的分布变化。结果在C2-cer作用下,T24细胞出现明显的凋亡形态学改变。对照组和10、20、40μmol/L的C2-cer处理组凋亡率分别为2.95%、14.23%、29.12%、48.46%,C2-cer处理组凋亡率显著高于对照组（P＜0.01）。对照组细胞AIF仅位于线粒体内,细胞核的AIF表达呈阴性。C2-cer处理组线粒体内AIF含量显著低于对照组（t=25.3,P＜0.01）,同时在细胞核内可见AIF表达。结论细胞外源性神经酰胺可以诱导人膀胱癌细胞凋亡,并呈现剂量依赖性。促进AIF从线粒体易位进入细胞核从而导致细胞凋亡可能在此过程中发挥重要作用。