Notch1信号通路对缺血再灌注损伤后神经元细胞增殖与凋亡的影响

摘要

目的 观察Notch1信号通路对缺血再灌注损伤后神经元细胞增殖与凋亡的影响.方法 将海马神经元细胞分成神经元组(cell组)、空载组为对照组(NC组)、Notch1干扰表达组(si组)和过表达NICD组(Notch1组).细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组缺血再灌注损伤前、后24、48和72 h的Notch1基因敏感性CCK-8值,绘制增殖率和抑制率曲线;流式细胞技术检测各组细胞缺血再灌注损伤后的凋亡率;Western blot检测各组缺血再灌注损伤后半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达.结果 缺血再灌注后24、48和72 h后,Notch1组CCK-8值(0.40±0.00、0.46±0.01、0.59±0.01)高于NC组(0.38±0.01、0.42±0.01、0.52±0.01,P＜0.05)与cell组(0.37±0.01、0.41±0.00、0.52±0.01,P＜0.05);缺血再灌注后24、48和72 h后,si组CCK-8值(0.34±0.00、0.34±0.01、0.45±0.01,P ＜0.05)低于cell、NC组;Notch1、cell和对照组细胞增殖率呈上升趋势,而si组呈下降趋势;Notch1组细胞抑制率呈下降趋势,而si组呈上升趋势;与空载组(4.38±0.31)比较,Notch1组(0.92±0.11,P＜0.05)晚期凋亡细胞和死亡细胞较少;si组凋亡细胞、晚期凋亡细胞和死亡细胞(16.05±1.03、9.23±0.56)比空载组(10.50±1.08、4.38±0.31,P＜0.05)增多,si组(68.97±5.13)活细胞较空载组(81.65±5.62,P＜ 0.05)减少;与空载组(4 474.313±208.000、2406.723±111.000、4 215.677 ±226.000)比较,Notch1组bcl-2(8 623.742±301.000,P＜0.05)蛋白表达增加而Caspase-3、bax(277.0034±25.000、709.949±66.000,P＜0.05)蛋白表达减少;si组与空载对照组比较,bcl-2(1 855.511±166.000,P＜0.05)蛋白表达减少而Caspase-3、bax(5 159.642±296.000、7 143.668±283.000,P＜0.05)蛋白表达增加.结论 神经元细胞缺血再灌注损伤后,Notch1表达与神经元细胞增殖呈正相关,而与神经元细胞凋亡呈负相关.