苯妥英钠对化疗耐药胶质母细胞瘤多药耐药相关蛋白1及O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因表达的影响

摘要

目的 观察苯妥英钠对胶质母细胞瘤细胞株8-MG-BA及胶质瘤细胞株H4细胞内多药耐药相关蛋白1(MRP1)及O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因表达的影响.方法 将体外培养的胶质瘤细胞株分为用药组及对照组.以梯度浓度苯妥英钠作用作用24、48、96 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中MRP1、MGMT mRNA的表达;Western blot测定细胞中MRP1、MGMT蛋白的水平.结果 (1)在8-MG-BA细胞中,可显示出明显的MGMT mRNA和MRP1mRNA条带;(2)5 mg/L苯妥英钠处理的8-MG-BA细胞中MRP1 mRNA表达量24h时减少,48 h内较明显(P＜0.05),但96h时恢复到处理前水平(P＞0.05).在10、20 mg/L苯妥英钠作用下,MRP1 mRNA的表达量在24h后明显减少,并持续到96 h(P ＜0.05).在苯妥英钠5 mg/L组中MGMT mRNA的表达在3个时间点差异均无统计学意义(P＞0.05),在10、20 mg/L苯妥英钠作用下,24h出现降低,48 h降低更明显,96 h仍维持低表达的状态(P＜0.01);(3)苯妥英钠处理后的细胞中MRP1及MGMT蛋白的表达与mRNA表达水平的改变呈现出时间上的一致性.结论 苯妥英钠可引起8-MG-BA细胞的MRP1、MGMT的mRNA及蛋白产物表达的下调.