低毫安电化学疗法诱导人乳腺癌耐药株MCF-7/阿霉素细胞凋亡及逆转多药耐药的研究

摘要

目的探讨低毫安电化学疗法（ECT）对人乳腺癌耐药株MCF-7/阿霉素（ADR）细胞诱导凋亡及逆转多药耐药（MDR）的作用机制。方法电化学处理细胞后继续培养6h和24h,用噻唑蓝（MTT）法、膜联蛋白V（Annexin V）染色、激光共聚焦显微镜观察ECT对肿瘤细胞的生长抑制、凋亡变化;荧光分光光度法检测细胞内ADR的浓度;实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法、Western blot法检测多药耐药基因（MDR1）、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3基因mRNA和蛋白表达。结果 ECT能明显抑制MCF-7/ADR细胞的生长,实验组凋亡率比对照组明显增加（P＜0.05）;5 C ECT作用后,细胞内的ADR积累增加了4.61倍,实验组PTEN、Caspase-3的相对表达量及蛋白表达随电量的增加明显增高;5 C时P-糖蛋白（P-gp）的相对表达量为0.293±0.013、p-Akt蛋白的相对表达量为0.397±0.020,与空白对照组比较,表达明显下降（P＜0.01）。结论 ECT可抑制MCF-7/ADR细胞生长,诱导凋亡,具有逆转多药耐药性,其机制可能主要与ECT作用Akt基因抑制磷脂酰肌醇3-激酶/（PI3K）/Akt信号通路等参与的凋亡途径相关。