转化生长因子-β1通过诱导上皮-间充质转化促进乳腺癌细胞侵袭转移的研究

摘要

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）通过诱导乳腺癌细胞上皮-间充质转化（EMT）影响细胞侵袭迁移能力及相关分子机制。方法 5μg/L TGF-β1作用于人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,诱导细胞发生EMT后,应用脂质体2000瞬时转染小干扰RNA（siRNA）沉默Smad2的表达,观察乳腺癌细胞的形态学变化,并通过Western blot检测Smad2静默前后细胞角蛋白、E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白、Smad2、磷酸化Smad2（p-Smad2）的表达变化;通过Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力的改变。结果 TGF-β1作用72 h后,乳腺癌细胞株MDA-MB-435S部分细胞由多角形转变为成纤维样细胞形态,间充质细胞标志物α-SMA、波形蛋白表达分别上调了3.86倍和1.17倍（P＜0.01）;上皮细胞标志物细胞角蛋白、E-钙黏素蛋白表达分别下降了63%和70%（P＜0.01）,p-Smad2表达明显上调1.2倍（P＜0.01）;侵袭的细胞数（79.20±7.35）明显多于空白组（48.93±5.43）,差异有统计学意义（P＜0.05）。沉默Smad2的表达后细胞角蛋白表达升高了44%（P＜0.01）,波形蛋白表达下降了59%（P＜0.01）,干扰组细胞侵袭数目（54.34±6.09）显著低于对照组（75.09±4.98）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论体外TGF-β1能够诱导乳腺癌细胞EMT,增强乳腺癌细胞侵袭转移能力;Smad2信号转导通路在乳腺癌细胞EMT中起重要作用。