3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1小干扰RNA对人胃癌BGC823细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 观察3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)小干扰RNA(siRNA)对胃癌BGC823细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用不同浓度的PDK1 siRNA体外分组转染BGC823细胞24、48、72 h;采用免疫细胞化学检测各组细胞中PDK1的蛋白表达;运用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞生长抑制率;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测各组细胞凋亡情况.结果 3条PDK1siRNA转染BGC823细胞后PDK1 mRNA水平(PDK1 siRNA1:5.01±1.21;PDK1 siRNA2:6.32±1.28;PDK1 siRNA3:6.41±1.32)均明显低于细胞对照组(11.17 ±2.36,P＜0.05),与其他2条抑制效率[PDK1 siRNA2:(21.56±3.87)％;PDK1 siRNA3:(22.01±3.98)％]比较,PDK1 siRNA1抑制效率最高[(34.37±4.09)％,P＜0.05],且具有时间依赖性(P＜0.05);与对照组[各时间段均为(0.00±0.00)％]比较,PDK1 siRNA1可增加BGC823细胞生长的抑制率[24 h:(13.02±2.96)％;48 h:(21.21 ±3.60)％;72 h:(34.37±4.09)％],且具有时间依赖性(P＜0.05);与对照组比较,PDK1 siRNA1转染BGC823细胞72 h后凋亡指数[AI,(18.24±2.73)％],较对照组细胞[(2.65±0.74)％]增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PDK1 siRNA能有效沉默BGC823细胞中PDK1表达,进而抑制BGC823细胞增殖,诱导其凋亡.