沉默畸胎瘤衍生生长因子-1基因表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响

摘要

目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默畸胎瘤衍生生长因子-1（TDGF-1）基因对人前列腺癌细胞PC3迁移的影响及机制。方法通过Silintfect分别将阴性对照siRNA、TDGF-1 siRNA转染到PC3细胞,空白（Blank）组无需特殊处理。分别纯化各组所提取的总RNA和蛋白;运用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达变化、Western blot法测上皮-间充质转化（EMT）相关标志物蛋白:波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）的表达变化。Transwell观察细胞迁移能力的变化。结果与阴性对照（0.988±0.011）、空白组（1.000±0.000）比较,实验干扰组（0.250±0.046）的TDGF-1 mRNA相对表达量明显降低（P=0.007,P=0.006）。干扰组的TDGF-1、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达量较阴性对照、空白组明显降低,E-cadherin蛋白则显著升高。Transwell实验结果示实验组[（84.667±7.572）个]细胞的迁移能力较空白组[（174.333±10.017）个]、阴性对照组[（168.333±4.041）个]明显减弱（P=0.022,P=0.025）。结论下调TDGF-1基因的表达能够减弱细胞的迁移能力,其机制可能与EMT有关。