针对不同靶位点的siRNA对人晶状体上皮细胞NF-κB P65表达的抑制作用

摘要

目的探讨针对核因子-κB(NF-κB)P65亚基的小干扰RNA(siRNA)对晶状体上皮细胞(LECs)NF-κB表达的影响。方法设计并合成3条NF-κBsiRNA,1条阴性对照siRNA。实验分为6组,A组为正常对照组,常规体外培养HLE-B3细胞;B组为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激组;C、D、E、F组为转染组,分别转染4条siRNA,24h后加入含TNF-α的培养基培养。免疫印迹法、实时荧光定量PCR法分别检测NF-κBP65蛋白与mRNA的表达。结果B组与A组比较,NF-κBP65表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。C组、D组与B组比较,NF-κB表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论特异性siRNA可以明显降低HLE-B3细胞株NF-κBP65蛋白及mRNA的表达,为RNA干扰治疗外伤性白内障奠定了基础。