猪脱细胞角膜基质组织结构特点与生物相容性研究

摘要

背景构建组织工程化角膜时，载体的选择十分重要。目前有多种载体可供选用，但脱细胞角膜基质是公认的较好载体。目的观察猪脱细胞角膜基质的组织结构特点，评价其与异种角膜基质和上皮细胞的生物相容性。方法取猪角膜组织进行组织块培养，经胰蛋白酶-EDTA酶消化角膜上皮、基质、内皮细胞，支架组织于-20℃冷冻干燥后灭菌保存。猪脱细胞角膜基质石蜡切片行常规苏木精一伊红染色，光学显微镜下观察组织的形态学特征；扫描电镜下观察其组织结构特点；并对其物理特性，如抗拉性、膨胀性、含水量和透明度进行评价。将猪脱细胞角膜基质移植到兔角膜基质层内，同时与体外培养的兔角膜上皮细胞共培养4周，分析其组织和细胞生物相容性。结果经酶消化处理后猪角膜组织中未见上皮、基质和内皮细胞，其胶原纤维直径大小、排列与正常角膜组织相同，抗拉性、膨胀性、含水量和透明度等物理特性与正常猪角膜相似。猪脱细胞角膜基质行异种兔角膜基质层间移植1周时可见轻度水肿，2周后水肿基本消退，4周时透明度较好。猪脱细胞角膜基质与兔角膜基质之间贴附良好，未见炎症反应及新生血管。兔角膜上皮细胞接种于猪脱细胞角膜基质上共培养4周后CK3表达阳性。猪脱细胞角膜基质脱水前与脱水2h、4h后及正常猪角膜基质间的抗拉性、膨胀性、含水量的差异均无统计学意义（P〉0．05），但脱水2h、4h后及正常猪角膜基质的透明度明显好于脱水前，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论猪脱细胞角膜基质组织结构与正常猪角膜相似，与兔角膜基质和上皮细胞具有良好的生物相容性。