p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对兔眼滤过术后肌成纤维细胞分化及细胞外基质合成的作用

摘要

背景各种原因导致滤过手术失败的共同点是滤过通道的成纤维细胞过度增生、分化，导致过度纤维化、瘢痕形成。研究发现，p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通道在成纤维细胞表型转化过程中发挥重要作用。目的探讨p38MAPK抑制剂SB203580对滤过手术后结膜下纤维化反应的抑制效果及其作用机制。方法12只清洁级新西兰白兔行常规青光眼滤过手术制作双眼滤过手术模型，模型兔按随机数字表法随机分为单纯滤过手术组、SB203580治疗组和丝裂霉素c（MMC）对照组。SB203580治疗组兔眼滤过术毕立即结膜下注射0．2g／LSB203580溶液1ml，MMC对照组兔眼术中用浸泡0．2g／LMMC的棉片置于术区结膜下及巩膜瓣下3rain。各组兔术后进行裂隙灯显微镜观察，术后1、3、7、10、14d使用Ieare回弹式眼压计测量眼压，术后14d抽取房水0．2ml，并获取手术滤过区结膜下组织标本，用ELISA法检测房水及滤过区结膜组织中的“一平滑肌肌动蛋白（d—SMA）、纤维连接蛋白的表达，用荧光实时定量PCR检测各组兔术眼滤过区结膜组织中ACTA2、结缔组织生长因子（CTGF）和I型胶原蛋白d2链（COLlA2）mRNA的表达。结果术后14d，单纯滤过手术组滤过泡血管化、瘢痕形成，SB203580治疗组滤过泡扁平、弥散，MMC对照组滤过泡呈苍白缺血状、扁平弥散。单纯滤过手术组、SB203580治疗组和MMC对照组兔间术前眼压值差异无统计学意义（F=0．065，P=0．937），术后眼压值随着时间的延长逐渐升高，各时间点的总体比较差异有统计学意义（F=32．873，P=0．030）。ELISA法检测SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的d—SMA质量浓度均明显低于单纯滤过手术组，而MMC组α-SMA质量浓度明显低于SB203580治疗组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的纤维连接蛋白质量浓度均明显低于单纯滤过手术组，而MMC对照组α-SMA质量浓度明显低于SB203580治疗组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。荧光实时定量PCR检测表明，各组兔术眼滤过区结膜下组织ACTA2、CTGF、COLlA2mRNA表达差异均有统计学意义（P〈0．01），以单纯滤过手术组表达量最高，SB203580治疗组次之，MMC对照组最低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论p38MAPK抑制剂SB203580能减少肌成纤维细胞分化及细胞外基质合成，减轻兔眼滤过手术后的组织纤维化反应。