丙型肝炎病毒非结构区NS3基因在大肠埃希菌中的可诱导性表达

摘要

目的构建丙型肝炎病毒(HCV)NS3基因的原核细胞表达载体,实现在大肠埃希菌中的可诱导性表达.方法应用聚合酶链反应(PCR)技术,以美国HCV-H株全长cDNA质粒为模板,扩增获得NS3基因片段,克隆到原核表达载体pET-30C(+)中,构建原核表达载体pET-NS3,转化BL21(DE3)宿主菌,以IPTG诱导,获得NS3蛋白的可诱导性表达,以HCV NS3的单链可变区抗体(ScFv)证实表达的NS3蛋白的特异性.结果以HCV NS3基因序列特异性引物,PCR扩增获得1 893 bp的NS3 DNA片段,插入pET-30C(+)表达载体.转化BL 21 (DE3)受体菌,经培养、IPTG诱导,获得了重组HCV NS3蛋白的表达,以HCV NS3的ScFv证实了表达的重组蛋白HCV NS3的特异性.结论以大肠埃希菌表达了HCV NS3的重组蛋白质.