抗SARS病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

摘要

目的制备抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体并研究其初步应用.方法用基因重组N蛋白免疫小鼠,取免疫后的鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌抗SARS病毒N蛋白单克隆抗体细胞株.将阳性细胞株接种小鼠腹腔制备单克隆抗体腹水并对抗体进行纯化,分析纯化抗体的相对亲和力.选择亲和力较高的抗体制备检测SARS病毒抗原的酶联免疫诊断试剂,并对其敏感性和特异性进行分析.结果共获得11株单克隆抗体细胞株,其中3株单抗与N蛋白具有较高的亲和力,4株纯化单抗与N蛋白反应很弱,其余4株单抗介于两者之间.用亲和力较高的单抗制备检测SARS病毒抗原的诊断试剂,其敏感性可达31 PFU/ml,而且与其他呼吸道病毒无交叉反应.结论该试剂特异性较好,可用于SARS病毒抗原的检测,其敏感性仍需用临床急性期样品进行评价.