SARS冠状病毒棘突蛋白的S1蛋白诱导小鼠产生中和抗体的研究

摘要

目的研究SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1的免疫原性,为SARS的实验诊断和新型疫苗的研究提供依据.方法用克隆有哺乳动物细胞密码子优化的SARS-CoV S1基因的质粒pcDNA3.1/S1或P-S1Ig 转染293 T细胞,用细胞的上清液纯化S1蛋白.以pcDNA3.1/S1质粒对BALB/c小鼠进行2次基因免疫,以纯化的S1蛋白进行加强免疫.用ELISA法检测小鼠抗SARS-CoV的特异性IgG抗体,并在Vero E6细胞上做体外中和实验,检测中和抗体.结果 S1蛋白诱导小鼠产生抗SARS-CoV的特异性抗体;1∶1 499.68稀释的S1蛋白免疫的小鼠血清可保护50%的细胞对1 000 TCID50的病毒攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染.结论 SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1能有效诱导机体产生具有高效保护作用的中和抗体免疫反应,可望发展成为理想的SARS棘突蛋白亚单位疫苗.