腺病毒载体介导HBsAg基因在哺乳动物细胞中的表达

摘要

目的探讨腺病毒载体介导乙型肝炎病毒(HBV)前S2/S(preS2/S)基因在几种哺乳动物细胞中的表达.方法制备携带HBV preS2/S基因的非复制型重组腺病毒Ad-HBs,体外转染人胚肾细胞(293)、绿猴肾细胞(Vero)、肝癌细胞系(HepG2)和间质干细胞(MSCs),荧光显微镜观察EGFP的表达,同时采用RT-PCR检测目的基因的转录,ELISA法检测目的基因的表达.结果MOI为20的重组腺病毒Ad-HBs转染293、Vero、HepG2细胞和MSCs,48 h后90%以上的细胞表达EGFP,同时细胞表达高滴度的HBsAg(A值＞3.229).结论腺病毒载体不仅能够介导HBV preS2/S基因于连续细胞系细胞中高效表达,也能介导HBV preS2/S基因于干细胞中高效表达.