TGF-β1对AngⅡ作用后的心肌细胞表面积和心钠素合成影响

摘要

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用后的心肌细胞表面积和心钠素合成影响.方法 分离培养原代心肌细胞,分为5组,一组常规培养,一组采用AngⅡ处理,一组采用TGF-β1抑制剂和AngⅡ共同处理心肌细胞(并根据TGF-β1不同浓度分为3组),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白表达.测定心肌细胞表面积,免疫放射法测定心钠素合成情况,硝酸还原法测定一氧化氮(NO)合成情况,试剂盒测定细胞中的蛋白含量,流式细胞术测定细胞凋亡情况,Western blot法测定各组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、细胞内信号转导蛋白2(smad2)表达.结果 AngⅡ处理后的心肌细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白水平均明显高于常规培养的心肌细胞(P<0.05).AngⅡ作用后的心肌细胞凋亡率升高,Bcl-2蛋白水平下降,smad2蛋白水平升高,细胞表面积明显增加,并且心肌细胞合成的心钠素水平也明显升高,心肌细胞蛋白含量也明显升高,而心肌细胞合成的NO含量下降,与常规培养的心肌细胞相比差异具有统计学意义(P<0.05).用不同浓度的TGF-β1抑制剂作用后的心肌细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平升高,smad2蛋白水平下降,细胞表面积有所降低,细胞合成的心钠素减少,心肌细胞蛋白含量也下降,心肌细胞合成的NO水平升高,与AngⅡ作用后的心肌细胞相比差异具有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1在AngⅡ作用后的心肌细胞中高表达,抑制TGF-β1可以减弱AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,这可能与抑制心肌细胞凋亡和促进NO合成有关.