致病性猪链球菌主要毒力因子基因多重PCR检测

摘要

目的建立多重PCR体系,实现猪链球菌毒力相关因子基因cps、mrp、epf（epf*）和sly的同步检测。方法根据上述毒力因子基因核苷酸序列,设计和合成4对特异性引物,通过体系和条件优化,建立多重PCR检测方法,并对72株种属背景明确的实验菌株（其中猪链球菌48株、阴性对照株24株）及49株猪临床分离的链球菌样本进行检测分析。结果48株猪链球菌中,cps2检出率为33.3%（16/48）、mrp检出率为29.2%（14/48）、epf检出率为25%（12/48）、epf*检出率为6.3%（3/48）、sly检出率为54.2%（26/48）,上述检测结果与菌株的毒力因子背景情况完全相符;24株阴性对照和49株猪临床分离样本毒力因子检测结果均为阴性。结论多重PCR可用于猪链球菌毒力相关因子CPS2、MRP、EF、Sly的基因检测,特异性和敏感性好,为该病快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术手段。