miR-152-3p通过DNMT1介导的SFRP2基因甲基化修饰促进绝经后骨质疏松发生

摘要

目的本研究旨在探讨绝经后女性骨质疏松症（osteoporosis, OP）中分泌型卷曲相关蛋白2（secreted frizzled-related protein-2, SFRP2）基因DNA甲基化对转录和蛋白表达的影响, 及miR-152-3p对SFRP2基因甲基化水平调控的分子机制。方法选择2017年9月至2020年9月于衡水市人民医院骨科就诊的绝经后OP患者作为研究对象, 并纳入同期在本院进行体检的200例自然绝经健康女性作为对照组。定量检测OP患者和对照组的SFRP2基因甲基化水平;采用定量实时聚合酶联反应检测SFRP2基因mRNA和miRNA-148a的相对表达量;使用酶联免疫吸附测定法检测SFRP2和DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase, DNMT1）的蛋白表达水平;使用miRNA-152-3p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及其阴性对照（mimic NC和inhibitor NC）处理SD大鼠成骨细胞, 检测DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平。结果 OP组的SFRP2基因甲基化水平为（3.87±0.76）%, 显著低于对照组（6.36±1.44）%（t=4.632, P＆0.001）;OP组的SFRP2基因mRNA表达量为3.35±0.79, 显著高于对照组（2.28±0.52）（t=4.858, P＆0.001）;OP组的SFRP2基因蛋白表达水平为（4.15±0.62）pg/ml, 显著高于对照组（2.83±0.51）pg/ml（t=4.858, P＆0.001）;OP组的miRNA-152-3p相对表达量为（3.14±0.76）, 显著高于对照组（1.63±0.51）（t=5.318, P＆0.001）;SD大鼠成骨细胞转染miR-152-3p后, mimic组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著降低, inhibitor组的DNMT1表达水平和SFRP2基因甲基化水平显著升高（P＆0.001）。结论 miR-152-3p可通过DNMT1调控SFRP2基因甲基化水平并参与OP的发生发展。