熊脱氧胆酸减轻内质网应激介导的胰岛β细胞凋亡的机制

摘要

目的探讨熊脱氧胆酸（Ursodeoxycholic acid,UDCA）通过减轻内质网应激保护链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的作用。方法链脲佐菌素（50 mg/kg）一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型（n=40）,并将14只造模成功大鼠按随机数字表法随机分为糖尿病组7只,UDCA组7只,另取正常对照组10只。自造模成功第10天开始以UDCA(40 mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃30 d。饲养期间观察大鼠血糖。处死后留取大鼠血清和组织标本,测定空腹胰岛素,TUNEL检测胰岛β细胞凋亡的形态学改变。胰腺组织总RNA采用定制基因芯片对89条凋亡相关基因的表达进行检测,以RT-PCR和Western印迹法验证相关基因的表达。结果糖尿病大鼠血糖在给予UDCA治疗后逐渐下降,但仍然未降到正常水平。糖尿病大鼠空腹胰岛素降低,给予UDCA治疗后空腹胰岛素水平有所增加。TUNEL显示糖尿病组大鼠予UDCA治疗后减少了由链脲佐菌素引起的胰岛β细胞凋亡（P＜0.01）。在89条基因中,糖尿病组上调基因42条,下调基因46条。UDCA可以逆转部分基因的影响。与对照组相比,糖尿病组大鼠Bax、Caspase-3、Bip、CHOP mRNA和CHOP蛋白显著上调（P＜0.05）,而抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA显著下调（P＜0.05）,给予UDCA治疗后这些参数均有明显改善（P＜0.05）。结论熊脱氧胆酸可能通过减轻内质网应激达到保护链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的作用。