H3K9me2调控核苷酸切除修复相关基因转录在亚砷酸钠致L-02细胞DNA损伤中的作用

摘要

目的 了解不同剂量亚砷酸钠(NaAsO2)对正常人肝细胞(L-02细胞)核苷酸切除修复(NER)相关基因mRNA转录水平及其启动子区组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(H3K9me2)修饰水平的影响.方法 以0(对照)、5、10、20 μmol/L的NaAsO2处理L-02细胞24 h(n = 3),采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测L-02细胞DNA损伤情况[Olive尾距(OTM)、尾部DNA百分含量(Tail DNA％)];实时荧光定量PCR法检测NER相关基因着色性干皮病(XP)基因A(XPA)、XP基因D(XPD)、XP基因F(XPF)mRNA表达水平;定量染色质免疫沉淀(CHIP)技术检测XPA、XPD、XPF启动子区(CHIP1、CHIP2)H3K9me2修饰水平.结果 OTM、Tail DNA％水平与染砷剂量均呈正相关(对照和5、10、20 μmol/L染砷组分别为0.35 ±0.09、0.56 ±0.18、3.18 ±0.31、4.52 ± 0.55,0.72 ±0.05、1.34 ± 0.26,3.93 ± 0.43、5.47 ± 0.65,r = 0.927、0.948,P均＜ 0.05).与对照组比较,10、20 μmol/L染砷组L-02细胞XPA、XPD、XPFmRNA表达水平均较低(P均＜ 0.05).与对照组比较,20 μmol/L染砷组L-02细胞XPA、XPD、XPF启动子区(CHIP1、CHIP2)H3K9me2富集水平均较高(P均＜ 0.05).结论 砷通过增加NER相关基因启动子区(CHIP1、CHIP2)H3K9me2富集水平,抑制NER相关基因转录,进而降低L-02细胞DNA损伤修复能力,导致DNA损伤加重.