砷暴露对大鼠原代星形胶质细胞分泌胶质细胞源性递质的影响

摘要

目的观察砷暴露对大鼠原代星形胶质细胞（astrocyte,AST）分泌胶质细胞源性递质的影响,探讨砷对学习记忆功能损伤的作用机制。方法 出生1~3 d的Wistar大鼠仔鼠,取双侧大脑半球,经处理获得原代培养脑AST,并通过胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色鉴定。AST分别在含0.0、2.5、5.0、10.0μmol/L亚砷酸钠的培养液中培养24 h,荧光双波长分光光度计法检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i);高效液相色谱（HPLC）法检测细胞培养液谷氨酸、D-丝氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量。结果胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色,AST纯度＞95%。不同浓度砷暴露组间AST内[Ca2+]i比较差异有统计学意义（F=20.030,P＜0.05）,其中10.0μmol/L砷暴露组AST内[Ca2+]i[（263.27±14.80）nmol/L]明显高于0.0、2.5、5.0μmol/L砷暴露组[（204.24±27.21）、（214.49±21.85）、（232.74±23.14）nmol/L,P均＜0.05]。不同浓度砷暴露组间AST分泌的D-丝氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸比较差异均有统计学意义（F值分别为26.599、33.539、5.599,P均＜0.05）,其中2.5、5.0、10.0μmol/L砷暴露组AST分泌的D-丝氨酸[（21.580±1.313）、（21.936±1.539）、（23.401±1.648）μmol/L]、甘氨酸[（26.353±2.449）、（29.711±1.530）、（29.234±2.057）μmol/L]和γ-氨基丁酸[（27.277±3.421）、（30.213±2.098）、（29.364±2.588）μmol/L]均高于0.0μmol/L砷暴露组[（16.017±1.046）、（16.763±3.007）、（22.736±4.139）μmol/L,P均＜0.05]。结论砷暴露可引起原代AST分泌胶质细胞源性递质增加,可能会损伤学习记忆功能。