瑞芬太尼调控miR-148a对骨肉瘤细胞生物行为的影响

摘要

cqvip:目的探讨瑞芬太尼对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法2017年8月—2018年12月于山东省枣庄矿业集团枣庄医院进行实验。收集经病理确诊的骨肉瘤患者36例,取其骨肉瘤组织及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其miR-148a的表达。以骨肉瘤MG63细胞为研究对象,设立对照组及瑞芬太尼0.1、1、10、100、200μmol/L组,分别处理MG63细胞,采用MTT细胞增殖实验测定瑞芬太尼抑制MG63细胞增殖的效果;流式细胞术检测瑞芬太尼对MG63细胞凋亡率的影响;qRT-PCR检测瑞芬太尼对MG63细胞中miR-148a表达的影响。将MG63细胞随机分为瑞芬太尼10μmol/L+anti-miR-NC亚组与瑞芬太尼10μmol/L+anti-miR-148a亚组,观测抑制miR-148a表达验证瑞芬太尼对MG63细胞增殖及凋亡的作用机制。Western-blot检测Cyclin D1、P21 Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与癌旁组织比较,骨肉瘤组织中miR-148a的表达水平显著降低(t/P=20.402/<0.001);24 h、48 h、72 h时瑞芬太尼各组可抑制骨肉瘤细胞增殖(F=182.419,189.181,165.061,P均<0.001),促进细胞凋亡(F/P=110.203/<0.001),随瑞芬太尼浓度升高P21表达水平升高(F/P=355.973/<0.001),Cyclin D1表达水平降低(F/P=273.731/<0.001),并可明显促进Bax表达(F/P=156.941/<0.001),抑制Bcl-2表达(F/P=288.568/<0.001);与瑞芬太尼10μmol/L+anti-miR-NC亚组比较,瑞芬太尼10μmol/L+anti-miR-148a亚组MG63细胞增殖活力显著升高,细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。结论瑞芬太尼可能通过上调miR-148a表达诱导骨肉瘤细胞凋亡,同时具有抑制骨肉瘤细胞增殖的作用。