RNA干扰抑制表皮生长因子受体表达对Colo-16细胞凋亡及化疗敏感性的影响

摘要

目的探讨靶向表皮生长因子受体（EGFR）基因的短发夹RNA（EGFR-shRNA）对皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞生长和雷帕霉素敏感性的影响。方法构建针对EGFR序列特异的shRNA表达载体,用脂质体转染Colo-16细胞。实验分正常细胞组、脂质体组、阴性对照组、阳性干扰组。分别采用免疫细胞化学和Western印迹测定EGFR蛋白的表达;噻唑蓝（MTT）法检测Colo-16细胞对雷帕霉素的敏感性;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 EGFR-shRNA可明显抑制Colo-16细胞EGFR的表达,抑制率达43.3%（F=44.6,P＜0.05）,并将Colo-16细胞对雷帕霉素的敏感性提高2.44倍。阳性干扰组Colo-16细胞的凋亡率为（12.65±0.091）%,与正常细胞组差异有统计学意义（F=2042.9,P＜0.05）。结论针对EGFR的质粒表达载体可以有效抑制Colo-16细胞EGFR的表达,增强Colo-16细胞对雷帕霉素的敏感性,并诱导其凋亡。