巨噬细胞膜包被的纳米粒对小鼠肝脏缺血/再灌注损伤的影响和机制研究

摘要

目的:探讨巨噬细胞膜包被的纳米粒(M-NPs)对小鼠肝缺血/再灌注损伤(HI/RI)的影响及机制.方法:提取C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)、制备PLGA微球(NPs),合成M-NPs并进行鉴定.构建小鼠HI/RI模型,将小鼠分为对照组(Control)、小鼠HI/RI组(HI/RI)以及小鼠HI/RI+M-NPs组(M-NPs).Control组不做处理,M-NPs组小鼠在建模后立即通过尾静脉注射300 mg/kg的M-NPs;HI/RI组在建模后注射等量生理盐水.24 h后,采集小鼠肝组织、外周血和Kupffer细胞.HE染色检测肝组织病理改变,检测血清ALT、AST和TBil水平,ELISA检测血清LPS水平,Western blotting检测Kupffer细胞TLR4、MyD88、p-NF-κB以及NF-κB的蛋白表达.结果:成功制备M-NPs.HI/RI组小鼠肝组织病理损伤明显,大量炎症细胞浸润;M-NPs组肝组织虽仍有一定程度的肝损伤,但与HI/RI组相比,肝组织结构相对正常,肝细胞病理改变较轻,浸润的炎症细胞也明显减少.血清ALT、AST、TBil、TNF-α、IL-6和LPS水平的变化趋势与HE染色结果一致.与HI/RI组相比,M-NPs组小鼠Kupffer细胞中TLR4、MyD88和p-NF-κB的蛋白表达显著降低.结论:M-NPs可能通过中和小鼠HI/RI时产生的LPS,抑制LPS与Kupffer细胞膜TLR4的结合,抑制Kupffer细胞TLR4/NF-κB通路的活化,抑制炎症反应,进而减轻小鼠HI/RI.