非瑟酮对肝脏缺血再灌注损伤小鼠肝细胞凋亡的影响

摘要

目的 探讨非瑟酮(fisetin)对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)小鼠肝细胞凋亡的影响.方法 将18只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术(SO)组、HIRI组和HIRI+fisetin组,每组6只.HIRI组和HIRI+fisetin组小鼠夹闭肝左叶和肝中叶的门静脉及肝动脉建立HIRI模型,SO组小鼠仅进行开腹和肝门游离手术.造模前1 h,HIRI+fisetin组小鼠经腹腔注射非瑟酮50 mg·kg-1,SO组和HIRI组小鼠经腹腔注射等体积的二甲基亚砜.采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,Western blot法检测小鼠肝组织中血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达,末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记法检测小鼠肝细胞凋亡.将对数生长期AML-12细胞分为对照组、缺氧复氧(HR)组和HR+fisetin组,对照组AML-12细胞正常培养,HR组和HR+fisetin组AML-12细胞制备HR模型,HR+fisetin组AML-12细胞在HR处理前1 h给予20μmol·L-1的非瑟酮预处理.采用细胞计数试剂盒检测AML-12细胞存活率,流式细胞术检测AML-12细胞凋亡.结果 HIRI组和HIRI+fisetin组小鼠血清ALT、AST水平显著高于SO组(P0.05).对照组、HR组和HR+fisetin组AML-12细胞凋亡率分别为(6.83±0.21)％、(24.44±0.63)％、(7.63±0.52)％,HR组AML-12细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05).结论 非瑟酮预处理能够减轻小鼠HIRI,其机制可能与HO-1蛋白高表达、抑制肝细胞凋亡有关.