中性粒细胞胞外诱捕网在肺内源性急性呼吸窘迫综合征中的作用研究

摘要

目的 本研究拟通过人群及动物模型探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肺内源性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用.方法 收集21例肺内源性ARDS患者(ARDS组),同期收治21例普通肺部感染患者(非ARDS组),检测外周血浆游离DNA(cf-DNA)含量并进行比较分析,了解NETs的总量有无区别;分离两组患者外周血中性粒细胞(PMNs),使用相同浓度(50 ng/mL)的佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酸(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)进行刺激,评估NETs产生的比例,了解PMNs功能有无变化;采用ARDS组及非ARDS组的肺泡灌洗液(BALF)与正常人PMNs进行共培养,评估NETs产生的比例,了解ARDS组肺部微环境有无异常.以内毒素(LPS,6 mg/kg)经鼻气管滴注法,建立ARDS动物模型,造模后24 h取肺组织,进行苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化,在动物模型验证NETs在ARDS发病中的作用.结果 ARDS组cf-DNA含量明显高于非ARDS组[(639.11±291.16)ng/mL vs.(169.29±194.98)ng/mL,P=0.000].在ARDS动物模型中,肺组织NETs的表达同样较对照组增加.两组患者外周血提取的PMNs在使用50 ng/mL PMA刺激3 h后,ARDS组产生NETs的比例高于非ARDS组(78.16％vs.19.7％,P=0.000).正常健康人来源的PMN在与BALF共培养后,ARDS-BALF刺激PMNs产生NETs的比例高于非ARDS-NETS(81.4％vs.29.7％,P=0.000).结论 NETs的异常增多在肺内源性ARDS的发病中起着作用,ARDS患者PMNs功能异常及肺内微环境紊乱可能是引起NETs异常增多的原因.