miR-186通过负调控Smad6对胶质瘤细胞迁移和上皮间质转化的影响

摘要

目的 研究miR-186通过负调控Smad6对人胶质瘤细胞迁移和上皮间质转化的影响.方法 qRT-PCR检测星形胶质细胞及胶质瘤细胞中miR-186和Smad6的表达,Western blot检测Smad6蛋白的表达水平;细胞分四组:空白对照组(U251)、模拟物组(miR-186 mimics)、质粒组(pc-Smad6)、共转染组(miR-186 mimics+pc-Smad6).Western blot检测各组细胞Smad6、上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达水平;划痕实验检测各组细胞的迁移情况.结果 与正常星形胶质细胞比,人胶质瘤细胞系U251中miR-186表达明显降低,而Smad6表达明显升高(P<0.05).较对照组,Smad6蛋白在miR-186 mimics组细胞中的表达显著下降,而在pc-Smad6组细胞中的表达则明显增加(P<0.05);miR-186 mimics组细胞迁移能力显著降低,而pc-Smad6组明显增强(P<0.05);miR-186 mimics组E-cadherin蛋白的表达显著升高,而Vimentin蛋白表达明显降低(P<0.05),在pc-Smad6组中两种分子的表达情况相反(P<0.05).对比pc-Smad6组,miR-186 mimics+pc-Smad6组Smad6蛋白的表达水平明显降低(P<0.05);miR-186 mimics+pc-Smad6组细胞的迁移能力明显降低(P<0.05);miR-186 mimics+pc-Smad6组Vimentin表达明显降低,而E-cadherin的表达显著升高(P<0.05).结论 miR-186可通过调控Smad6的表达而抑制人胶质瘤细胞迁移和上皮间质转化.