HPLC-MS/MS法测定人血浆中伊立替康及主要代谢产物的浓度

摘要

目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血浆中伊立替康(CPT-11)及主要活性代谢产物7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)及无活性的葡萄糖醛酸化SN-38(SN-38G)的浓度。方法以氘代伊立替康、氘代SN-38、氘代SN-38G为内标,沉淀蛋白法进行提取。色谱柱:ZORBAX XDBC8(2.1 mm×50 mm,5μm),水相:0.1%甲酸,有机相:纯甲醇,进行梯度洗脱,流速:0.35 m L·min-1。通过电喷雾离子源,以正离子多反应监测模式(MRM)进行检测,考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度和准确度、稳定性、基质效应和提取回收率。结果伊立替康标准曲线方程为y=1.32×10-3x-5.30×10-3(r=0.999 7),在10~2000 ng·m L-1线性关系良好,定量下限为10 ng·m L-1。SN-38标准曲线方程为y=8.50×10-3x+4.00×10-3(r=0.999 5),在2~400 ng·m L-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L-1。SN-38G标准曲线方程为y=6.53×10-3x-1.28×10-3(r=0.9997),在5~1000 ng·m L-1线性关系良好,定量下限为5 ng·m L-1。日内与日间RSD均小于15%,平均回收率>92%。结论该方法简便快速,准确度高,灵敏度好,专属性强,适用于同时测定人血浆中伊立替康、SN-38及SN-38G的浓度。