千层纸素A对人三阴型乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用

摘要

目的研究千层纸素A抑制三阴型乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的作用及其相关机制。方法将MDA-MB-231细胞分为4组:空白组和低、中、高3个浓度实验组。空白组不做任何处理,低、中、高3个浓度实验组分别给予千层纸素A 100,150和200μmol·L^-1,各组细胞分别培养24,48和72 h。用CCK-8法检测各组细胞的增殖抑制率,用Annexin V-FITC和PI双染色法流式细胞术分析凋亡比,用蛋白质印迹法检测Bcl2相关X凋亡蛋白(Bax)、Bcl2凋亡蛋白(Bcl2)、自噬相关蛋白(BECN1)的表达水平。结果24 h千层纸素A对细胞的半数抑制浓度是(146.66±7.59)μmol·L^-1。干预24 h后,空白组和低、中、高3个浓度实验组的增殖抑制率分别为0,(41.70±3.40)%,(54.24±2.12)%和(62.10±2.65)%;这4组的细胞凋亡率分别为(9.94±2.22)%,(33.20±4.11)%,(45.72±3.69)%和(88.30±2.97)%;这4组的Bax蛋白相对表达量分别为0.38±0.01,0.70±0.02,0.72±0.02和0.88±0.05;这4组的Bcl2蛋白相对表达量分别为1.26±0.02,1.01±0.04,0.88±0.02和0.66±0.01;这4组的BECN1蛋白相对表达量分别为0.42±0.01,0.68±0.01,0.89±0.02和1.05±0.05。上述指标:3个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论千层纸素A能抑制MDA-MB-231细胞的体外生长,其机制可能与上调Bax/Bcl2的比值和BECN1蛋白表达,进而诱导细胞凋亡和自噬有关。