基于Toll样受体4/髓样分化蛋白88通路研究马齿苋多糖对小鼠急性肺损伤的保护作用

摘要

目的 探讨马齿苋多糖对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用及其机制。方法 水提醇沉法提取马齿苋多糖，配置浓度为10 mg·mL-1马齿苋多糖溶液。将小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组。低、高剂量实验组分别灌胃10和40 mg·kg-1·d-1马齿苋多糖溶液，阳性对照组灌胃2 mg·kg-1·d-1地塞米松，空白组和模型组灌胃等量蒸馏水。灌胃7 d后，除空白组外，其余各组均腹腔注射10 mg·kg-1 LPS制备急性肺损伤模型。24 h后眼眶取血及肺组织样本。用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量；用比色法测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶（MPO）和血清中超氧化物歧化酶（SOD）含量；用原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡情况；用蛋白质印迹法检测肺中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化蛋白88（MyD88）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）表达情况。结果 空白组、模型组、阳性对照组、低、高剂量实验组的血清TNF-α含量分别为（60.03±1.17）,（133.08±3.92）,（75.20±4.04）,（105.14±8.67）和（84.71±3.23）pg·mL-1;肺组织匀浆MPO含量分别为（5.82±1.09）,（17.92±0.97）,（8.60±0.98）,（12.99±0.88）和（10.40±1.17）U·g-1;SOD含量分别为（45.06±4.13）,（23.45±3.81）,（36.16±8.99）,（30.45±1.59）和（31.56±5.14）U·mL-1;肺细胞凋亡指数分别为（6.38±0.81）%,（29.42±4.89）%,（21.96±2.68）%,（23.64±3.38）%和（23.48±1.81）%;TLR4蛋白表达水平分别为0.74±0.12,2.44±0.81,1.11±0.53,1.48±0.45和1.44±0.42;MyD88蛋白表达水平分别为1.35±0.27,2.70±0.98,1.37±0.30,1.59±0.31和1.61±0.33;Bax蛋白表达水平分别为0.88±1.17,2.97±0.96,1.48±0.32,1.71±0.32和1.62±0.30。上述指标，低、高剂量实验组与模型组比较，差异均有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）。结论 马齿苋多糖可通过抑制Toll样受体4/髓样分化蛋白88通路，改善炎症与氧化应激反应，通过降低Bax蛋白表达减少肺组织细胞凋亡，对LPS所诱导急性肺损伤起保护作用。