HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氨蝶呤的浓度

摘要

目的建立一种高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析人血浆中甲氨蝶呤(MTX)的浓度,并用于临床治疗药物监测。方法血浆样本200μL经乙腈600μL沉淀蛋白处理,用Waters System C18柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为乙腈(10%异丙醇)-水(0.1%甲酸)梯度洗脱;流速:0.8 mL·min^(-1);柱温:40℃。ESI正离子模式,MTX定量离子对m/z 455.2→m/z 308.1,内标甲硝唑定量离子对m/z 172.2→m/z 128.2。结果人血浆中MTX在0.1~10μmol·L^(-1)线性关系良好(r2=0.9942),方法回收率分别为99.2%~103.4%,MTX绝对回收率达到71.99%,基质效应101.9%~107.1%,批内、批间RSD均不大于8%,在室温放置12 h、冻融循环3次和-40℃冰冻30 d的稳定性良好。成功用于我院48例使用甲氨蝶呤化疗患者体内MTX的浓度测定。结论所建方法简便、准确、灵敏,适用于临床MTX治疗药物监测。