重组腺相关病毒介导的Dystrophin小基因载体构建及在mdx鼠中表达

摘要

目的:研究重组腺相关病毒载体(rAAV)介导的人Dystrophin小基因(SMCKA3999)载体构建及在DMD模型鼠(mdx鼠)的表达.方法:将SMCKA3999质粒,包装质粒pXX2、腺病毒成分辅助质粒pXX6共转染293细胞,包装重组腺相关病毒载体介导的SMCKA3999基因(rAAVSMCKA3999),以斑点杂交法测定病毒滴度,将rAAVSMCKA3999单点注射到mdx鼠腓肠肌,于注射后7个月取肌肉提取蛋白质行Western blot检测.结果:经三质粒共转染法构建的rAAVSMCKA3999病毒滴度为5.0×1010,在mdx鼠骨骼肌表达持续7个月以上.结论:构建的rAAVSMCKA3999载体为进一步DMD基因治疗研究奠定了基础.