以对乙酰基苯基磷酸二钠盐为底物的碱性磷酸酶连续监测法

摘要

目的 合成对乙酰基苯基磷酸二钠盐(PAP-PNa2),并建立以PAP-PNa2为底物的碱性磷酸酶(ALP)测定方法.方法 在半自动生化分析仪上采用连续监测法,建立实验参数.结果 本法测定对乙酰基酚(PAP)最大吸收峰为325 nm;ALP的Km=0.376mmol/L;340 nm时PAP的ε为23 390 L·mol-1·cm-1,AMP缓冲液浓度为0.438 mol/L时,最适底物浓度5.0mmol/L,最适pH值为10.4,延迟期60 s,线性反应期15 min;线性范围为0～1 110 U/L.Hb<115.62 mg/L及胆红素浓度达171.0μmoL/L对测定结果无影响.本法总ALP的参考范围为:男63.1～118.3 U/L,女52.5～89.0 U/L.结论 该方法重复性好,线性反应期长,干扰因素少,适用于自动生化分析.