17-β雌二醇对培养人脐静脉内皮细胞缺氧损伤的保护作用

摘要

目的探讨缺氧对培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的损伤及17-β雌二醇(E2)对其保护作用.方法胰蛋白酶灌流消化法培养原代人脐静脉内皮细胞,建立细胞缺氧模型.随机分为五组:对照组、缺氧12h组、缺氧24h组、E2+缺氧12h组、E2+缺氧24 h组.对照组为常氧下培养的HUVECs,缺氧组按缺氧模型予缺氧下培养HU-VECs,E2+缺氧组予预先加入17-β E2后再缺氧下培养HUVECs.收集各组细胞培养液,Greiss反应测定一氧化氮(NO),放射免疫法测内皮素-1(ET-1);收集各组HUVECs,进行细胞计数,细胞骨架染色观察细胞形态.结果缺氧12h,内皮细胞数由对照组(4.33±0.24)×106/ml减少至(3.23±0.21)×106/ml(P＜0.01),形态无明显变化;其分泌NO由对照组(19.28±2.08)nmol/106 cell下降至(12.77±1.90)nmol/106cell(P＜0.01),ET-1由对照组(95.7±11.32)pg/ml上升至(138.3±10.37)pg/ml(P＜0.01).缺氧24h,内皮细胞数由对照组(4.33±0.24)×106/ml减少至(2.73±0.19)×106/ml(P＜0.01),形态变长体积变小;其分泌NO由对照组(19.28±2.08)nmol/106cell下降至(10.76±1.57)nmol/106cell(P＜0.01);ET-1由对照组(95.7±11.32)pg/ml上升至(150.1±15.41)pg/ml(P＜0.01).经预先17-βE2处理后能有效抑制上述改变(P＜0.01).结论缺氧可使内皮细胞结构和功能均受损,17-βE2对这种缺氧损伤有保护作用.