外周血内皮祖细胞磁探针标记及体外磁共振成像的实验研究

摘要

目的应用纳米磁探针三氧化二铁（Fe2O3）-多聚赖氨酸（PLL）复合物体外标记兔外周血内皮祖细胞（EPCs）,磁共振（MR）对标记细胞成像。方法合成 Fe2O3-PLL 复合物。分离兔外周血单个核细胞,贴壁法筛选出 EPCs,传代培养,Fe2O3-PLL 标记祖细胞,普鲁士蓝染色、电子显微镜显示细胞内铁,四氮噻唑蓝（MTT）比色试验评价不同浓度 Fe2O3-PLL 标记 EPCs 后对细胞生长状况的影响,流式细胞分析检测标记、未标记细胞的细胞周期、细胞凋亡,应用 MR 的不同序列进行细胞群成像。结果普鲁士蓝染色、电镜观察均可见铁颗粒位于细胞质内,标记率接近100%,MTT 比色试验示10μg/ml 至200μg/ml 7个铁浓度组,Fe2O3-PLL 标记后细胞的光吸收值与未标记者比较,差异无统计学意义,流式细胞分析结果显示 Fe2O3-PLL 标记后细胞周期、细胞凋亡与未标记细胞间差异无统计学意义。磁共振成像（MRI）显示标记 Fe2O3-PLL 的细胞群较未标记者信号降低,以 T2*加权像（T2*WI）信号强度变化率最大;标记后7 d 的信号强度变化率均较标记1 d 者下降。结论 Fe2O3-PLL可以有效标记兔外周血 EPCs,其对细胞的活力、增殖等生物学特性无明显影响。临床应用型1.5 TMR 可在体外进行标记细胞群成像,间接反映干细胞的数量和分裂增殖状态。