三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞中P27^(kip1)、JAB1表达的影响及其作用机制

摘要

背景与目的:三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)作为治疗实体瘤的新药已应用于临床,但其作用机理尚不清楚。本研究拟探讨As2O3对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,及其对细胞周期素依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKIs)P27kip1和P27kip1相关蛋白c-Jun结合蛋白-1(c-Jun activation domain-binding protein1,JAB1)表达的调控作用。方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用0～8μmol/LAs2O3处理96h,用WST-8法检测细胞的存活率。用2!mol/LAs2O3作用72h,在指点时间点收集细胞,用Westernblot技术检测P27kip1、JAB1在SMMC-7721细胞中的表达,同时采用核浆分离方法及细胞免疫荧光技术检测P27kip1、JAB1表达和亚细胞定位的改变。结果:与对照组比较,As2O3可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,96h时IC50为(1.81±0.41)μmol/L。2μmol/LAs2O3处理12h后,SMMC-7721细胞中P27kip1蛋白表达增加,而JAB1蛋白表达减少。在As2O3处理后12h、24h,P27kip1与JAB1均发生从胞浆向胞核的易位。免疫荧光检测P27kip1和JAB1的亚细胞定位情况,结果也显示2μmol/LAs2O3可诱导两者在胞核的积聚。结论:As2O3可下调JAB1的表达,从而影响P27kip1的核内外分布及表达,并影响P27kip1的功能状态,进而参与调控肝癌细胞的增殖。