鼻咽癌组织差异表达cDNA序列的克隆与鉴定

摘要

目的：分析鼻咽癌组织中的差异基因，寻找与鼻咽癌病理过程相关的新的癌基因和抑癌基因。方法：应用抑制性消减杂交法，构建了鼻咽组织与正常鼻咽组织的消减库；用差异筛选技术筛选出了阳性克隆；用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ杂交证实了阳性克隆的可靠性；用序列分析确定了阳性克隆的性质。结果：从消减库中获得了１２个阳性克隆；序列分析表明，８个克隆与已知基因高度同源，２个为新的候选基因，２个新的候选基因在两个不同的消减库中确实存在差异，而其中的一个新基因在鼻咽癌组织和细胞系中下调表达。结论：抑制性消减杂交是分析相关基因的较好的方法，发现了两个与鼻咽癌病理过程有关的新的ｃＤＮＡ。