乙肝病毒x基因转染对奥曲肽抑制肝癌细胞HepG2生长的影响

摘要

背景与目的:体外及动物实验表明,生长抑素类似物奥曲肽可抑制肝癌生长,但奥曲肽治疗肝癌的临床疗效并不满意,原因不明。本研究拟探讨有乙型肝炎病毒感染的肝癌是否因其有x基因而改变了对奥曲肽作用的反应及其可能的机制。方法:采用3H鄄TdR掺入法了解细胞DNA合成,细胞免疫化学检测细胞的PCNA表达,AnnexinⅤ荧光标记法及TUNEL法观察细胞的凋亡,Westernblot法检测HepG2和HepG2x细胞ERK及生长抑素受体(somatostatinreceptors,SSTR)的表达。结果:1×10-5～1×10-9mol/L的奥曲肽显著地、浓度依赖性地抑制HepG2细胞3H鄄TdR掺入及PCNA表达(r=-0.917,P<0.01)。奥曲肽也促进HepG2细胞凋亡,其AnnexinⅤ的阳性率为(14.20±2.57)%,对照组仅为(1.18±0.13)%,两组间差异有显著性(P<0.05);TUNEL检测奥曲肽组凋亡指数为(18.8±3.3)%,对照组仅为(3.6±0.9)%,两组间差异有显著性(P<0.05)。奥曲肽及奥曲肽加拉米夫定对HepG2x细胞抑制生长和诱导凋亡作用不明显。HepG2x细胞的SSTR鄄2和SSTR鄄5表达均明显低于HepG2细胞(P<0.01);HepG2x细胞的细胞外信号调节激酶鄄1(extracellularsignal鄄regulatedkinase鄄1,ERK鄄1)和ERK鄄2表达均显著高于HepG2细胞(P<0.05)。奥曲肽未明显改变HepG2x细胞的ERKs表达。结论:转染x基因后的HepG2细胞SSTR鄄2及SSTR鄄5明显下调,导致奥曲肽对HepG2x细胞的生长抑制作用明显降低。