黄芪多糖对分泌白细胞介素12树突细胞亚群的免疫调控效应与机制

摘要

目的观察黄芪多糖（APS）对分泌IL-12树突细胞（DC）亚群CD11chighCD45RBlowDC功能的影响。方法磁珠分选技术获得BALB/c小鼠脾脏CD11chighCD45RBlowDC和CD4+T淋巴细胞。在CD11chighCD45RBlowDC中加入不同浓度APS（50、100、200μg/mL）处理,以不加APS的细胞作为对照,应用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-12水平,流式细胞仪检测细胞表面分子CD40、CD80、CD86、I-A/E及Toll样受体4（TLR4）的表达。将CD4+T淋巴细胞分为正常对照组（未行任何处理）、未刺激组(加入未经APS处理的CD11chighCD45RBlowDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度APS刺激组(加入经200μg/mL APS处理后的CD11chighCD45RBlowDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度APS刺激+抗体1组(加入经200μg/mL,APS处理后的CD11chighCD45RBlowDC、IL-12抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养)和高浓度APS刺激+抗体2组(加入经200μg/mL APS处理后的CD11chighCD45 RBlow DC、IL-12同型对照抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养)。采用噻唑蓝法测定CD4+T淋巴细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞培养液中IL-4和γ干扰素水平。对数据行多组间单因素方差分析。结果与未加APS刺激相比,3种浓度APS均显著增强CD11chighCD45RBlowDC表面分子CD40、CD80、I-A/E及TLR4表达及IL-12分泌,其中IL-12分泌呈APS浓度依赖性;CD86表达无明显变化。高浓度APS刺激组CD4+T淋巴细胞增殖能力高于未刺激组（F=13.438,P＜0.05）;高浓度APS刺激组细胞γ干扰素水平为（2784±137）pg/mL,高于未刺激组[（1952±101）pg/mL,F=12.177,P＜0.05];高浓度APS刺激组细胞IL-4水平为（172±20）pg/mL,明显低于未刺激组[（193±19）pg/mL,F=11.963,P＜0.05]。高浓度APS刺激+抗体1组前述3项指标表达水平较未刺激组明显改善,高浓度APS刺激+抗体2组前述3项指标表达水平与高浓度APS刺激组接近。结论 APS能够通过促进CD11chighCD45RBlowDC中IL-12的表达,诱导CD4+T淋巴细胞向Th1型反应分化,通过激活CD11chighCD45RBlowDC增强免疫活性。