常规树突状细胞启动和调控急性肺损伤早期炎症反应的机制研究及树突状细胞靶向性的免疫调节治疗探索

摘要

目的:
　　 明确肺常规树突状细胞(cDCs)对急性肺损伤(ALI)早期炎症反应和肺损伤的启动和调控效应及其具体的作用机制。
　　 方法:
　　 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、0h-ALI组、6h-ALI组、24h-ALI组、FLT3-ligand(FLT3L)预处理组、来他替尼(lestaurtinib)预处理组和DMSO对照组，分别给予FLT3L、lestaurtinib预处理5天后复制ALI模型，6h或24h后处死小鼠留取肺组织，采用流式细胞术检测CD11c+CD11b+双阳性细胞占肺单个核细胞的比例评价肺cDCs的数量，检测肺cDCs表达MHCⅡ或CD80的比例评价肺cDCs的成熟程度;ELISA检测肺IL-6、TNF-α的浓度评价肺部炎症反应的强度;计算肺湿重/体重比评价肺水肿程度;肺组织HE染色行组织病理学检查和肺损伤评分评价肺损伤程度;比色法检测肺MPO活性评价中性粒细胞的浸润;qRT-PCR检测转录因子T-bet及GATA-3mRNA的表达评价辅助性T细胞Th1/Th2亚群的漂移;ELISA检测肺IFN-γ及IL-4水平评价肺组织Th1/Th2型细胞因子的平衡。
　　 结果:
　　 6h-ALI组肺cDCs占肺单个核细胞的比例(％)显著高于0h-ALI组[(2.25±0.25)vs(0.93±0.40),P＜0.05]及24h-ALI组[(2.25±0.25)vs(1.01±0.28),P＜0.05]，其肺cDCs表达MHCⅡ的比例(％)亦较0h-ALI组[(55.51±11.72)vs(6.67±0.87),P＜0.05]和24h-ALI组[(55.51±11.72)vs(10.94±2.55),P＜0.05]升<中文标题>=高。而与6h-ALI组相比，FLT3L预处理显著增加ALI成模后6h肺cDCs占肺单个核细胞的比例(％)[(6.08±3.16)vs（2.25±0.25），P＜0.05]及其表达MHCⅡ的比例(％)[(73.15±9.07)vs(55.51±11.72)，P＜0.05]，还可上调成模后6h肺组织IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，并提高肺湿重体重比(P＜0.05)和肺病理损伤评分(P＜0.05)，此外FLT3L预处理组肺组织MPO活性、T-bet/GATA-3的表达比例和IFN-γ水平均较6h-ALI组显著升高(均P＜0.05)。而与DMSO对照组相比，lestaurtinib预处理显著降低ALI成模后6h肺cDCs占肺单个核细胞的比例(％)[(1.41±0.13)vs(2.36±0.27)，P＜0.05]及其表达MHCⅡ的比例(％)[(41.56±8.18)vs(50.85±6.91)，P＜0.05]，还可下调成模后6h肺组织IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，减轻肺湿重体重比(P＜0.05)和肺病理损伤评分(P＜0.05)，此外lestaurtinib预处理组肺组织MPO活性、T-bet/GATA-3的表达比例和肺IFN-γ水平均较DMSO对照组显著下降(均P＜0.05)。
　　 结论:
　　 ALI早期即存在肺cDCs的快速聚集和分化成熟，功能活化的肺cDCs进而可通过加剧肺内中性粒细胞的浸润与增强Th1免疫应答及促炎性细胞因子的释放启动和放大ALI早期炎症反应级联，最终导致和加重肺损伤。

目录

声明

摘要

本论文专用缩略词表(Abbreviations)

前言

综述

主要实验材料、仪器与试剂

第一部分：常规树突状细胞启动和调控急性肺损伤早期炎症反应的机制研究

参考文献

第二部分：常规树突状细胞靶向性的FLT3信号通路治疗急性肺损伤的研究

参考文献

结论

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