半衰期延长获得PAI—1抗性的t—PA突变体的构建,表达及特性分析

摘要

用基因重级及定位突变技术成功地构建了ｔ－ＰＡ的Ｋ１区缺失突变体ｔ－ＰＡｄｅｌＫ１、ＰＡＩ－１结合位点缺失突变体ｔ－ＰＡｄｅｌ（２９６－３０２）及两者的组合突变全ｔ－ＰＡｄｅｌ（Ｋ１，２９６－３０２），并在ＣＯＳ－７细胞中实现三者的暂时性表达，在ＣＨＯ细胞中实现了ｔ－ＰＡｄｅｌ（Ｋ１，２９６－３０２）的稳定性表达。对表达产物的生物学特性分析表明，ｔ－ＰＡｄｅｌ（２９６－３０２）及ｔ－ＰＡｄｅｌ（Ｋ１