人白细胞介素—3基因在酿酒酵母中的分泌表达

摘要

利用ＰＣＲ突变方法，改造了人白细胞介素－３（ｈＩＬ－３）ｃＤＮＡ，在成熟蛋白编码顺序５＇端前突变入了Ｘｂａ Ｉ酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Ｌｙｓ－Ａｒｇ的密码子。改造后的ｈＩＬ－３ ｃＤＮＡ插入大肠杆菌－酵母穿梭质粒ｐＶＴ１０２ｕ／α，使其准确融合于α－交配因子前导序列之后，并置于启动子ＡＤＨ１调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌Ｓ－７８筛选后，３０℃培养４８ｈ，上清能明显促进ｈＩＬ－３依赖细胞ＴＧ