甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要

采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白（Ｐａｒａｔｈｙｏｉｄｈｏｒｍｎｏｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＴＨｒＰ）ｃＤＮＡ，其核苷酸序列与国外发表资料相比，有６个核苷酸不同，其中仅９２位密码子的不同导致氨基酸变异，即由脯氨酸变为丝氨酸，将克隆的ＰＴＨｒＰｃＤＮＡ插到原核表达载体ｐＥＴ－３ａ的Ｔ７噬菌体启动子下游，转化大肠杆菌后得到高效表达，并经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生