重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究

摘要

为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichiapastoris细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Pichiapastoris中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响.发现采用酿酒酵母.性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高10%左右.而载体整合方式、整合拷贝数、5'非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响.筛选到的高表达株经高密度发酵,细胞湿重达460g/L,发酵液上清的人血清白蛋白含量为1.0g/L.