草木樨状黄芪甲硫氨酸抗性系的原生质体培养及植株再生

摘要

建立了草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides Pall.)甲硫氨酸抗性系原生质体再生植株的实验体系.以茎切段诱导的松软愈伤组织为材料,通过酶法分离出大量有活力的原生质体.原生质体经培养持续分裂形成了愈伤组织,并高频率地分化出再生苗.比较了不同培养基、培养方法和培养密度对原生质体分裂和再生的影响.结果表明,原生质体以3×105/mL的植板密度,采用琼脂糖岛法培养在附加1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.5mg/L 6-苄氨基嘌呤(6BA)、500mg/L水解酪蛋白、3%蔗糖、0.3mol/L甘露醇的KM8p培养基中,可获得最佳效果,其细胞分裂频率达38%左右.原生质体培养后仍然保持对甲硫氨酸的抗性,同时对乙硫氨酸表现交叉抗性.