人β2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

摘要

β2-微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC) Ⅰ类分子的轻链部分, 为制备MHC Ⅰ类分子四聚体的必要成分. 根据已报道的序列设计特异引物, 利用RT-PCR方法从人白细胞中克隆了β2m基因, 并构建了成熟β2m的原核表达载体, 在大肠杆菌中得到高效表达. 表达的β2m大部分在包涵体中,经洗涤、变性和复性,并以强阴离子交换柱层析纯化,获得SDS-PAGE纯的人重组β2m,Western印迹法分析表明该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.此工作为制备MHC Ⅰ类分子四聚体奠定基础.