发酵条件对毕赤酵母表达重组人干扰素ω糖基化的影响

摘要

发酵条件是影响毕赤酵母(P.pastoris)表达外源重组糖蛋白时糖基化的重要因素.通过菌体浓度、起始pH值、甲醇诱导浓度和周期、装液量等摇瓶发酵实验,研究不同发酵条件对毕赤酵母表达分泌型重组人干扰素ω(rhIFNω)过程中糖基化的影响;同时,在连续培养过程中考察pH值变化对rhIFNω糖基化的影响和分批发酵过程中rhIFNω糖基化的变化.结果表明,控制菌体密度250g/L(WCW)、起始pH值6.0、装液量小于30 mL、甲醇诱导浓度15g/L、甲醇诱导3次(每24 h诱导一次)等发酵条件,有利于摇瓶发酵过程中rhIFNω的糖基化;控制pH值7.0～7.5可促进rhIFNω的糖基化;分批发酵过程中,糖基化与非糖基化rhIFNω的含量有同比变化趋势,但糖基化rhIFNω所占比例明显低于摇瓶发酵实验的结果,其原因有待进一步研究.